抗生素(antibiotics)是由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產(chǎn)物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。
抗生素作為一種能抑制和殺滅細(xì)菌的藥物,已被廣泛用于醫(yī)療衛(wèi)生、畜禽養(yǎng)殖、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等行業(yè),為社會的經(jīng)濟發(fā)展做出了很大的貢獻。在畜禽養(yǎng)殖業(yè)抗生素主要是作為飼料添加劑,用于預(yù)防和治療動物的疾病以及促進動物的生長。但是畜禽養(yǎng)殖業(yè)中抗生素的不合理應(yīng)用的現(xiàn)象已經(jīng)很普遍,不可避免的造成牛奶中殘留抗生素,不僅危害人類健康,同時也影響牛奶的品質(zhì),造成重大經(jīng)濟損失,所以需要抗生素檢測手段來規(guī)范這種現(xiàn)象。
檢測方法
ELISA酶聯(lián)免疫技術(shù)
Enzyme Linked Immunosorbent Assay(簡寫ELISA)
指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,進行免疫反應(yīng)的定性和定量方法。
具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。
牛奶中抗生素殘留的危害與檢測
這一方法的基本原理是:
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
免疫膠體金技術(shù)
Immune colloidal gold technique
指以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。
具有操作便捷、安全,檢測快速、準(zhǔn)確,成本低等優(yōu)點。
免疫層析法 (Immunochromatography)是一種基于免疫膠體金技術(shù)的快速診斷技術(shù),實質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到納米金顆粒表面的包被過程。
吸附機理可能是納米金顆粒表面負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結(jié)合,而且吸附后不會使生物分子變性,由于金顆粒具有高電子密度的特性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點,因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。
由于球形的納米金粒子對蛋白質(zhì)有很強的吸附功能,可以與葡萄球菌A 蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和實驗中成為非常有用的工具。
免疫層析是以NC膜為載體,利用微孔膜的毛細(xì)管作用,使滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,如同層析一般。金磁微粒復(fù)合物干片粘連在近NC膜條下端(C),膜條測試區(qū)(T)包有特異抗體,當(dāng)試紙條下端進入液體標(biāo)本樣中,下端吸水材料吸取液體向上端移動,流經(jīng)C處時,使干片上的金磁微粒復(fù)合物復(fù)溶,并帶動其向膜條滲移,若標(biāo)本有特異性抗原時,可與金磁微粒復(fù)合物的抗體結(jié)合,形成的金標(biāo)抗原—抗體復(fù)合物流至測試區(qū),被固相抗體所捕獲,形成抗體—抗原—金標(biāo)抗體復(fù)合物,在膜上T處出現(xiàn)紅色控制線。
冠宇儀器抗生素殘留檢測儀GY-615通過反射光譜法測試CT線強弱程度可以定量檢測抗生素殘留(青霉素類、磺胺類、喹諾酮類、四環(huán)素類、頭孢類、酰胺類等抗生素殘留)含量;抗生素殘留檢測儀廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場、水產(chǎn)市場、水產(chǎn)深加工企業(yè)、檢驗檢疫單位等使用。